波形蛋白(Vimentin)

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波形蛋白(Vimentin)

2024-07-14 21:23| 来源: 网络整理| 查看: 265

​​波形蛋白 (Vimentin) 是一种 III 型中间丝蛋白,分子量约为 54 kDa。波形蛋白可锚定和支撑间充质细胞胞质内的细胞器。上皮间质转化 (EMT) 期间,波形蛋白的表达上调。EMT 在神经发育、伤口愈合和癌症转移过程中发生。波形蛋白染色可作为间质来源的细胞或发生 EMT 的细胞的标志物。由于波形蛋白在细胞内的多种作用,从癌症学到细胞骨架动力学等多个学科都可将其作为研究对象。

癌细胞在转移过程中常出现 EMT 等特征,而波形蛋白会通过改变细胞形状和运动来促成 EMT。因此,靶向磷酸化波形蛋白的免疫治疗有望在治疗转移性肿瘤的同时保留非肿瘤细胞1 。蛋白质组学相关研究表明,波形蛋白是前列腺癌和乳腺癌等多种恶性肿瘤的转移相关因子。这表明其可能在肿瘤进展过程中发挥重要作用,并成为转移的潜在生物标志物2。

应用

​​我们的波形蛋白抗体、蛋白和试剂盒系列已在多种应用(包括 Western Blot、流式细胞术、免疫细胞化学、免疫组化、免疫沉淀和 ELISA)进行了验证。

​按 1/250 比例稀释纯化 ab92547 并对石蜡包埋的人宫颈癌进行免疫组化染色。使用 1/500 比例稀释的 HRP 山羊抗兔 IgG H&L (ab97051) 作为二抗。样本用苏木精复染。使用 pH 9.0 的 Tris-EDTA 缓冲液进行抗原修复。使用 PBS 代替一抗作为阴性对照,如插图所示。​

免疫组化(福尔马林/PFA 固定石蜡包埋切片)- 波形蛋白抗体 [EPR3776] - 细胞骨架标志物 (ab92547)

使用 ab8978 对野生型 HAP1 细胞(上图)和 VIM 基因敲除 HAP1 细胞(下图)中的波形蛋白进行染色。用 100% 甲醇固定细胞(5 分钟),再用 0.1% 聚乙二醇辛基苯基醚透化细胞 5 分钟,然后用 1% BSA/10% 正常山羊血清/0.3 M 甘氨酸在 0.1% PBS-Tween 中封闭细胞 1 小时。然后将细胞与 1 μg/mL 的 ab8978 和 1/250 比例稀释的 ab202272(兔 α 微管蛋白单克隆抗体 [EP1332Y] (Alexa Fluor®594))在 +4°C 下孵育过夜,然后与 2 μg/mL ab150117(山羊抗小鼠 IgG 二抗 (Alexa Fluor®488))室温孵育 1 小时(绿色)。核 DNA 用 DAPI 标记成蓝色。

用共聚焦显微镜 (Leica-Microsystems, TCS SP8) 拍摄图像。

免疫细胞化学/免疫荧光 - 波形蛋白抗体 [RV202] - 细胞骨架标志物 (ab8978)关于波形蛋白研究的产品建议波形蛋白抗体​应用​种属反应性​波形蛋白抗体 [EPR3776](ab92547)WB, Flow Cyt, ICC/IF, IHC-P, IHC-Fr人、小鼠、大鼠、恒河猴波形蛋白抗体 [RV202](ab8978)WB, IP, Flow Cyt, ICC/IF, IHC-Fr, IHC-P多种​波形蛋白(磷酸化 S55)抗体 [4A4] (ab22651)ELISA, Flow Cyt, ICC/IF, IHC-Fr, IHC-P, WB人、小鼠、大鼠波形蛋白(磷酸化 S38)抗体 [EP1069Y] (ab52942)WB人、小鼠、大鼠波形蛋白(磷酸化 S72)抗体 [EP1070Y] (ab52944)WB, IP人、小鼠、大鼠波形蛋白抗体 [EPR3776] (Alexa Fluor®488) (ab185030)Flow Cyt, ICC/IF人、小鼠、大鼠​波形蛋白抗体 [EPR3776] (Alexa Fluor®647) (ab194719)Flow Cyt, ICC/IF小鼠​波形蛋白抗体 [EPR3776] (Alexa Fluor®594) (ab154207)Flow Cyt, ICC/IF人、小鼠波形蛋白 ELISA 和检测试剂盒​检测​灵敏度范围​人波形蛋白分析 ELISA 试剂盒 (ab173190)​比色法8 µg/ml人波形蛋白 ELISA 试剂盒 (ab246526)*比色法1.563 ng/ml - 100 ng/mlKO 细胞系​人 VIM 基因敲除 HeLa 细胞系 (ab255446)​蛋白​重组人波形蛋白 (ab73843)​重组人波形蛋白 (His Tag) (ab84704)​

*该试剂盒属于 SimpleStep ELISA® 系列。​

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参考文献

Ohara, M. et al. Phosphorylated vimentin as an immunotherapeutic target against metastatic colorectal cancer Cancer Immunology, Immunotherapy (2020)Li, M. et al A novel function for vimentin: the potential biomarker for predicting melanoma hematogenous metastasis Journal of Experimental & Clinical Cancer Research 29, Article 109 (2010)

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